芪冬活血饮对急性肺损伤小鼠肺泡巨噬细胞iRhom2/TACE信号通路的影响

[目的]探索芪冬活血饮对肠缺血/再灌注诱导的急性肺损伤小鼠肺泡巨噬细胞未活化的菱形蛋白2(inactive rhomboid protein 2,iRhom2)/肿瘤坏死因子-α转化酶(tumor necrosis factor-αconvertase,TACE)信号通路的影响.[方法]通过肠缺血/再灌注方法构建急性肺损伤小鼠模型.24只无特定病原体(specific pathogen free,SPF)级雌性C57BL/6小鼠被随机分为6组,每组4只,即正常组,假手术组,模型组,芪冬活血饮低(2mL·kg-1)、中(4mL·kg-1)、高(8mL·kg-1)剂量组.芪冬活血饮低、中、高剂量组小鼠在造模前24、12h以及造模后2、14h分别用2、4、8mL·kg-1芪冬活血饮灌胃,2次/d,共4d;模型组予等量的0.9％氯化钠溶液灌胃;正常组和假手术组不给药.末次给药24h后,分离并培养肺泡巨噬细胞.以酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白介素-6(interleukin-6,IL-6)的水平.以末端标记法(terminal-deoxynucleoitidyl transferase mediated nick end labeling,TUNEL)染色分析肺上皮细胞凋亡情况.实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time-quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)和Western blot检测肺泡巨噬细胞中iRhom2和TACE的mRNA和蛋白表达水平.[结果]与假手术组比较,模型组小鼠肺泡巨噬细胞TNF-α和IL-6分泌水平显著增加(P<0.0001);经芪冬活血饮治疗后,TNF-α和IL-6水平以浓度依赖的方式显著降低(P<0.01,P<0.001,P<0.0001).TUNEL结果显示,芪冬活血饮显著抑制急性肺损伤模型小鼠的肺上皮细胞凋亡(P<0.05,P<0.01,P<0.001).与假手术组比较,模型组小鼠巨噬细胞中iRhom2和TACE mRNA和蛋白表达被显著激活(P<0.001,P<0.0001,P<0.01);经芪冬活血饮治疗后,巨噬细胞中iRhom2和TACE表达以浓度依赖的方式显著降低(P<0.05,P<0.001,P<0.0001).[结论]芪冬活血饮能够有效改善肠缺血/再灌注诱导的急性肺损伤,其机制可能与抑制小鼠肺泡巨噬细胞中iRhom2/TACE信号通路有关.