基于p38 MAPK炎症相关通路探讨荣筋拈痛方对大鼠体外退变软骨细胞的机制影响

目的:基于p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)炎症相关信号通路,观察荣筋拈痛方含药血清对脂多糖诱导体外软骨细胞炎症模型的影响.方法:荣筋拈痛方含药血清制备;软骨细胞培养;脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导大鼠体外退变软骨细胞模型,随机分为空白组、对照组、模型组、实验组;采用酶联免疫吸附测定(Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay,ELISA)检测相关炎性因子表达情况,实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(Real-time Quantitative PCR Detecting System,qPCR)、蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)法观察荣筋拈痛方含药血清干预退变软骨细胞后相关分子的影响.结果:①对照组及荣筋拈痛方含药血清可显著下调软骨细胞上清液中白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)的表达,差异具有统计学意义(P<0.05);②qPCR、WB结果显示:对照组和荣筋拈痛方含药血清可下调p38丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-Activated Protein Kinase,MAPK)、MEK3、促分裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶-激酶3(Mitogen-Activated Protein/Extraeellular Signal Regulated Kinase-Kinase3,MEKK3)、c-myc、c-jun、c-fos基因、蛋白含量表达,差异具有统计学意义(P<0.05).结论:荣筋拈痛方含药血清可通过调控p38MAPK、MEK3、MEKK3、c-myc、c-jun、c-fos基因、蛋白表达,在一定程度上延缓软骨细胞的退变进程.