基于RNA-seq转录组学分析一贯煎对酒精性脂肪性肝病小鼠TGFBR2受体表达的影响
Chinese Journal of Information on Traditional Chinese Medicine(2021)
摘要
目的 通过RNA-seq转录组学测序探讨一贯煎防治小鼠酒精性脂肪性肝病(AFLD)的潜在信号通路.方法 制备小鼠AFLD模型,同时予一贯煎药液灌胃.HE染色观察小鼠肝脏损伤情况,检测小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、三酰甘油(TG)含量,油红O染色观察肝脏脂肪生成情况,RNA-seq转录组测序技术检测小鼠肝脏差异表达基因,并进行KEGG通路富集分析,同时以RT-qPCR进行验证.体外实验以酒精刺激AML12细胞诱导AFLD细胞模型,通过TGFBR2和SLC2A4抗体拮抗相应的肝细胞膜受体,同时给予一贯煎溶液干预,Nile Red荧光染色观察细胞内脂质合成变化.结果 HE染色显示,一贯煎可减轻AFLD小鼠肝损伤;油红O染色显示,一贯煎可降低肝组织内脂质沉积;与对照组比较,模型组小鼠血清ALT、TG含量明显增加(P<0.000 1),与模型组比较,一贯煎组小鼠血清ALT、TG含量减少(P<0.000 1),模型组、一贯煎组较对照组血清AST含量增加,差异无统计学意义(P>0.05);KEGG通路富集结果表明,FOXO信号通路中细胞膜受体蛋白TGFBR2、SLC2A4可能是一贯煎防治小鼠AFLD的关键信号通路蛋白.体外细胞实验表明,一贯煎和TGFBR2抗体单用或联用均能显著降低酒精诱导的AML12细胞脂肪变性,SLC2A4抗体对酒精诱导AML12细胞脂肪变性无明显影响.结论 一贯煎可能通过影响肝细胞膜受体蛋白TGFBR2的表达而起到防治AFLD的药理效应.
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