基于miR-21、miR-150和miR-200b研究参苓白术散对克罗恩病大鼠肠黏膜屏障的干预机制

目的:探讨参苓白术散对克罗恩病大鼠肠黏膜屏障中miR-21、miR-150和miR-200b的作用机制,深入分析参苓白术散治疗克罗恩病的相关作用机制.方法:将66只SD大鼠随机分为正常对照组(予0.9％的氯化钠溶液20 mL/kg)、模型组(予0.9％的氯化钠溶液20 mL/kg)、阳性对照组(予6％美沙拉嗪缓释颗粒悬浊液0.2 g/kg)、低剂量参苓白术散组(予参苓白术散5 g/kg),中剂量参苓白术散组(予参苓白术散10 g/kg),大剂量参苓白术散组(予参苓白术散20 g/kg),每组11只.除正常对照组外,其余大鼠建立克罗恩病模型.治疗3周后,观察不同剂量参苓白术散对结肠组织病理形态的影响;Western blot法(WB)检测肠黏膜组织中Claudin-1蛋白的含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测肠黏膜组织中miR-21、miR-150和miR-200b微小核糖核酸(Micro RNA,miRNA)的表达量.结果:与正常对照组比较,模型组大鼠结肠组织中Claudin-1蛋白和miR-200b的miRNA表达量明显降低(P<0.01),而miR-21、miR-150的miRNA表达量明显升高(P<0.01).与模型组比较,阳性对照组和三个参苓白术散组大鼠结肠组织中Claudin-1蛋白、miR-200b的miRNA表达量显著升高(P<0.05或P<0.01);而阳性对照组和参苓白术散中、高剂量组miR-21、miR-150的miRNA表达量减少(P<0.05或P<0.01),参苓白术散中、高剂量组中Claudin-1蛋白表达量与正常对照组相比无显著差异(P>0.05).结论:参苓白术散具有明显改善肠黏膜屏障的作用,其作用机制之一可能是通过调控miR-21、miR-150和miR-200b的表达量,从而调节Claudin-1蛋白的表达,达到改善克罗恩病大鼠肠黏膜屏障功能的作用.并且本研究结果提示在克罗恩病模型大鼠结肠组织中Claudin-1蛋白的表达与miR-21、miR-150呈负相关,与miR-200b呈正相关.