水蛭素对大鼠NRK-52E细胞尿酸盐转运体表达的影响

目的 探讨金边蚂蟥活性成分水蛭素对大鼠NRK-52E细胞尿酸盐转运体表达的影响.方法 采用不同浓度(0、0.01、0.1、1、5和10 mg·mL-1)水蛭素处理大鼠NRK-52E细胞,细胞计数试剂盒-8(Cell counting kit-8,CCK8)检测水蛭素对细胞的毒性作用.将细胞分为正常组、黄嘌呤组(200μmol·L-1)、水蛭素低(0.01 mg·mL-1)、中(0.1 mg·mL-1)、高浓度组(5 mg·mL-1),培养24 h后,Hoechst33258染色观察细胞形态,实时荧光定量PCR(Real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞中葡萄糖转运蛋白9(Glucose transporter 9,GLUT9)、有机阴离子运输蛋白(Organic anion transporter 1,OAT1)和尿酸盐转运体1(Urate transporter 1,URAT1)mRNA及蛋白表达水平.结果 水蛭素对大鼠NRK-52E细胞毒性作用较小.与正常组比较,黄嘌呤组细胞碎片增多,细胞中GLUT9和URAT1 mRNA及蛋白表达均显著升高(P<0.05),而OAT1 mRNA和蛋白表达均显著降低(P<0.05).与黄嘌呤组比较,水蛭素组细胞碎片减少,GLUT9和URAT1表达显著降低(P<0.05),OAT1表达显著升高(P<0.05),且高浓度组比低浓度组更明显(P<0.05).结论 水蛭素可能通过调节肾细胞尿酸盐转运体(GLUT9、URAT1、OAT1)的表达对尿酸排泄的发挥作用.