补肾强筋胶囊对膝骨关节炎的治疗作用及分子机制研究

目的:探讨补肾强筋胶囊对膝骨关节炎(KOA)的治疗作用及相关分子机制.方法:将40只SD大鼠随机分为4组,每组10只.采用关节腔注射木瓜蛋白酶和半胱氨酸建立KOA大鼠模型.正常组和模型组给予生理盐水灌胃,补肾高、低剂量组分别灌胃0.486 g/kg和0.243 g/kg补肾强筋胶囊.6周后处死大鼠并采集膝关节软骨和血清进行检测.苏木精-伊红(HE)染色和番红-固绿染色观察各组大鼠膝关节软骨病理变化并进行改良Mankin评分;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠血清白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹(Western Blot)检测MMP13、Beclin1、LC3B、ULK1、p-AMPK、p-mTOR mRNA和蛋白的表达.结果:与模型组相比,补肾高、低剂量组大鼠膝关节软骨退变程度明显减轻且Mankin评分显著降低,差异有统计学意义(P＜0.01).补肾高、低剂量组大鼠血清IL-13和TNF-α水平显著降低,差异有统计学意义(P＜0.01).补肾高、低剂量组大鼠软骨MMP13 mRNA和蛋白表达显著降低,Beclin1、LC3B-Ⅱ/Ⅰ、ULK1mRNA和蛋白表达显著升高,p-mTOR蛋白表达显著降低,差异有统计学意义(P＜0.01).补肾高剂量组大鼠软骨p-AMPK蛋白表达显著升高,差异有统计学意义(P＜0.01).结论:补肾强筋胶囊可能通过AMPK/mTOR通路上调KOA模型大鼠膝关节软骨自噬水平从而延缓病程.