加减驻景方对脉络膜新生血管动物模型缺氧信号因子表达的影响

目的 观察加减驻景方对CNV动物模型缺氧信号因子表达的影响.方法 氪激光诱导BN大鼠建立CNV动物模型,造模后大鼠被随机分为模型组、中药组、西药组和联合组.模型组大鼠用生理盐水灌胃,中药组用加减驻景方灌胃,西药组用玻璃体腔注射康柏西普,联合组用加减驻景方灌胃+玻璃体腔注射康柏西普.光凝后7 d、14 d、21 d处死大鼠取材,通过免疫组织化学法、实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)和蛋白免疫印迹(Western blotting)技术检测CNV组织中AKT/mTOR/HIF-1α/VEGF信号通路mRNA和蛋白的相对表达量.结果(1)免疫组化:模型组和各治疗组AKT、mTOR、HIF-1α、VEGF蛋白表达均呈阳性,随光凝时间延长,各治疗组目的蛋白表达量均低于模型组(P<0.05).(2)RT-qPCR:模型组与各治疗组各目的基因mRNA相对表达量较空白组均显著增多(P<0.05).除mTOR以外,各治疗组目的基因mRNA相对表达量均低于模型组(P<0.05).各治疗组AKT、mTOR、VEGF mRNA相对表达量由高到低依次为中药组、西药组和联合组(P<0.05).中药组HIF-1αmRNA相对表达量高于西药组和联合组(P<0.05),西药组和联合组之间比较无统计学意义(P>0.05).(3)Western blotting:模型组与各治疗组目的蛋白相对表达量,较空白组均显著增多(P<0.05),除AKT蛋白以外,各治疗组目的蛋白相对表达量均低于模型组(P<0.05).AKT和HIF-1α蛋白相对表达量中药组高于西药组和联合组(P<0.05).mTOR与VEGF蛋白相对表达量由高到低依次为中药组、西药组和联合组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 AKT/mTOR/HIF-1α/VEGF信号通路的激活促进了CNV的生成,加减驻景方可通过抑制AKT/mTOR/HIF-1α/VEGF信号通路活性,发挥抑制CNV的作用,联合组作用最强.