粪便样本中志贺菌分离培养方法的优化

目的 优化从腹泻患者粪便标本中分离培养志贺菌的方法.方法 使用EC肉汤和志贺菌增菌液对129份粪便样本进行增菌培养,采用普通PCR方法检测ipaH基因,使用木糖赖氨酸去氧胆酸钠琼脂(XLD)培养基、麦康凯琼脂(MAC)以及沙门志贺菌培养基(SS)等选择性培养基分离培养志贺菌.使用志贺菌参考菌株,进行模拟增菌培养,利用荧光定量PCR方法分析不同增菌液的增菌效果.结果 利用志贺菌增菌液在厌氧条件下增菌后的样本,ipaH基因阳性率(55.81％vs.38.76％,P＜0.01)和菌株分离率(26.36％vs.37.21％,P＞0.05)均高于EC肉汤.除了 XLD培养基,使用MAC以及SS等选择性培养基,能够提高菌株分离率.福氏志贺菌在厌氧条件下增菌,能提高菌的含量(Ct值降低),但对宋内志贺菌的影响不明显.结论 对腹泻患者粪便样本进行选择性增菌,结合分子生物学方法,使用2～3种不同选择性培养基进行分离培养,可能是提高志贺菌分离率的有效方法.