铜绿假单胞菌ampG基因的结构及其对耐药的影响

目的 分析临床分离的铜绿假单胞菌ampG基因结构和功能及其在抗药性方面的影响.方法 用VITEK 2 Compact全自动微生物分析仪对细菌进行鉴定和药敏分析,对ampG基因全长引物扩增产物进行测序,将PAO1的ampG基因进行点突变实验,研究铜绿假单胞菌中ampG基因的结构与功能的关系.结果 在189株PA中有166株测序成功,发现有84株在52个位点上发生了112次碱基置换,其中C-T间的转换占51.8％(58次),G-A间的转换为25.0％(28次),其余为碱基颠换;在发生的52个位点突变中,有10个引起了氨基酸的改变;2个保守氨基酸(I53和W90)基因定点突变时,当I53突变为53S或53T(I53S或I53T)时,氨苄西林MIC水平大大下降,AmpC酶活性也明显下降,而W90突变时,氨苄西林的MIC和AmpC酶活性未见明显变化.结论 铜绿假单胞菌ampG基因的突变率很高,但AmpG蛋白是稳定的,是维持AmpG正常功能所必需的,在细菌诱导表达β-内酰胺酶的过程中起到重要作用,说明其耐药机制更为复杂.