齐墩果酸对鼻咽癌细胞Numb/Notch通路及放疗敏感性的影响

目的 探讨齐墩果酸对鼻咽癌CNE2细胞放疗敏感性的影响及其可能的机制,为提高鼻咽癌治疗效果提供理论依据.方法 体外培养鼻咽癌CNE2细胞,分为4组:空白对照组(未处理)、齐墩果酸低剂量(2.5 μmol/L齐墩果酸溶液)组、齐墩果酸中剂量(5.0 μmol/L齐墩果酸溶液)组、齐墩果酸高剂量(10.0 μmol/L齐墩果酸溶液)组.以6 MV-X线照射细胞,采用MTT实验检测细胞增殖情况并筛选最佳辐射剂量;采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况;采用免疫印迹法检测凋亡相关蛋白[Bcl-2相关蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)]及通路相关蛋白[细胞命运决定子(Numb)、Notch1、SPLIT多毛增强子1重组蛋白(Hes1)、发状分裂相关增强子-5(Hes5)]表达水平.结果 随着辐射剂量的增加(2、4、6、8 Gy)CNE2细胞增殖抑制率逐渐升高;同一辐射条件下,与空白对照组比较,齐墩果酸低、中、高剂量组CNE2细胞增殖抑制率均升高,差异有统计学意义(P＜0.05),且呈剂量依赖性.照射剂量为4 Gy时CNE2细胞增殖抑制率为50％左右,因此选用照射剂量为4 Gy进行后续实验.与空白对照组比较,齐墩果酸低、中、高剂量组CNE2细胞凋亡率均升高,差异有统计学意义(P＜0.05);且呈剂量依赖性.与空白对照组比较,齐墩果酸低、中、高剂量组CNE2细胞Bcl-2、Notch1、Hes1、Hes5蛋白表达显著降低,Bax、caspase-3、Numb蛋白表达显著升高,差异均有统计学意义(P＜0.05);且均呈剂量依赖性.结论 齐墩果酸可抑制CNE2细胞增殖并促进其凋亡,增加其放疗敏感性,其作用机制可能与其促进Numb蛋白释放,抑制Notch信号通路活化有关.