耐碳青霉烯类大肠埃希菌对替加环素异质性耐药的机制

目的 研究耐碳青霉烯类大肠埃希菌(CREC)对替加环素异质性耐药的分子机制,为临床治疗和合理应用抗生素提供依据.方法 收集2017年1月至2019年3月间多中心分离的CREC,用改良E-test法和菌群谱型分析微量滴定法(MPAP)初筛,群体谱分析法(PAP)确认CREC对替加环素的异质性耐药情况,并用荧光定量RT-qPCR分析外排泵相关基因、外排泵调节基因和膜孔蛋白基因的表达.结果 改良E-test法和MPAP法筛查CREC对替加环素异质性耐药(CREC-TGC-HR)的阳性率分别为25.0％(14/56)和39.3％(22/56).经PAP法确认,有37.5％(21/56)为阳性.改良E-test法的CREC-TGC-HR检出率低于PAP法,差异有统计学意义(P<0.05).3家医院CREC-TGC-HR的检出率分别是43.8％(7/16)、43.5％(10/23)和23.5％(4/17),两两比较差异均无统计学意义(P>0.05).与CREC-TGC-HR原始菌株相比,耐药亚群外排泵基因acrA、acrB表达分别上调1.79倍、5.01倍;其相关调控基因marA、marB表达分别上调5.38和2.18倍;膜孔蛋白基因ompC表达下调2.35倍,差异均有统计学意义(P<0.05).膜孔蛋白基因ompF和ompX的表达比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 首次报道CREC对替加环素异质性耐药,且异质性耐药率较高,需要采用有效的方法检测CREC-TGC-HR,为临床治疗和合理应用抗生素提供依据.