miR-295抑制高糖诱导的小鼠成骨细胞系MC3T3-E1的凋亡

目的 探讨微小RNA(miR)-295对高糖诱导的小鼠成骨细胞系MC3T3-E1凋亡的影响及其机制.方法 将MC3T3-E1细胞分为对照(Ctrl)组、高糖(HG)组(以22 mmol/L葡萄糖诱导培养)、(HG+miR-control)组(转染miR-control后高糖诱导)和(HG+miR-295)组(转染miR-295模拟物后高糖诱导);实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测MC3T3-E1细胞中miR-295表达水平;噻唑蓝(MTT)法检测MC3T3-E1细胞存活率;流式细胞测量术检测MC3T3-E1细胞凋亡率;免疫印迹法检测Wnt/β-catenin通路相关蛋白β连环蛋白(β-catenin)、Dickkopf同源物1(DKK1)、c-Myc和B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验检测miR-295和DKK1的靶向关系.结果 与对照组比较,HG组MC3T3-E1细胞中miR-295表达水平、细胞存活率和β-catenin、c-Myc及Bcl-2蛋白表达水平均明显降低(P<0.05),而细胞凋亡率和DKK1蛋白表达水平均明显升高(P<0.05);与(HG+miR-control)组比较,(HG+miR-295)组MC3T3-E1细胞中miR-295表达水平、细胞存活率和β-catenin、c-Myc、Bcl-2蛋白表达水平均明显升高(P<0.05),而细胞凋亡率和DKK1蛋白表达水平均明显降低(P<0.05).Dkk1可能是miR-295的靶基因.结论 miR-295可能通过下调DKK1表达激活Wnt/β-catenin通路来抑制高糖诱导的成骨细胞系MC3T3-E1的凋亡.