加味黄芪建中汤通过调节miR-516a-5p治疗血小板减少症

目的:研究加味黄芪建中汤对原发性免疫性血小板减少症(ITP)患者微小RNA-516a-5p(miR-516a-5p)表达的调控,探究其调节免疫细胞的作用机制.方法:收集2017年6月～2018年6月于我院就诊的ITP患者32例,随机分成地塞米松治疗组和地塞米松+加味黄芪建中汤综合治疗组,另取同期健康体检者15例作为对照组.磁珠分选对照组和未治疗组ITP患者外周血CD4+T细胞,采用RT-qPCR法检测miR-516a-5p的表达量;利用血细胞分析仪检测ITP患者的血小板数量,分析miR-516a-5p表达水平与血小板数量的相关性.同时提取地塞米松治疗组和地塞米松+加味黄芪建中汤综合治疗组ITP患者的外周血CD4+T细胞,RT-qPCR检测治疗前后miR-516a-5p的表达量,Western blot检测吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和p-mTOR的蛋白水平;流式细胞术检测外周血中CD4+T细胞及调节性T细胞(Treg)的比例.结果:与健康对照组相比,ITP患者的miR-516a-5p表达水平显著上调,且与血小板数量呈负相关(P<0.01).而地塞米松治疗和地塞米松+加味黄芪建中汤综合治疗都能抑制miR-516a-5p表达,且地塞米松+加味黄芪建中汤综合治疗的效果更显著(P<0.01);治疗前后相比,两组血小板数量均显著升高(P<0.01),而与地塞米松组相比,地塞米松+加味黄芪建中汤综合治疗组升高更显著(P<0.01).经过各组比较,我们发现治疗后均促进了Treg细胞比例的增加和IDO的表达上调,同时mTOR的磷酸化被抑制,其中地塞米松+加味黄芪建中汤综合治疗组更为显著.结论:加味黄芪建中汤可通过下调miR-516a-5p的表达,从而影响IDO/mTOR通路,促进Treg细胞比例的增加,为ITP的中医药临床治疗提供理论依据.