脂联素调控miR-221/Timp3信号对糖尿病肾病小鼠肾脏的保护作用

目的:探讨脂联素(ADPN)调控微小RNA-221(miR-221)/金属蛋白酶组织抑制物3(Timp3)信号对糖尿病肾病(DN)小鼠的保护作用及相关机制.方法:选取36只健康雄性C57BL/6小鼠为研究对象,其中30只构建DN小鼠模型,根据不同干预因素分为DN组、pCMV-ADPN转染组(DA组)、空载体组(DP组)、miR-221抑制剂组(DM组)和miR-221抑制剂对照组(DC组),剩余6只作为正常对照组(control组).连续干预8周后,检测血清肌酐、血清ADPN及24 h尿总蛋白(UTP);称取小鼠体重(BW)和肾脏重量(KW),计算肾脏肥大指数(KW/BW);HE染色观察肾脏病理改变;RT-qPCR检测肾组织miR-221和Timp3 mRNA的表达;Western blot检测Timp3蛋白表达.结果:pCMV-ADPN转染DN小鼠8周后,与DP组比较,小鼠血清肌酐水平虽有所降低,但差异无统计学显著性(P>0.05),而血清ADPN水平显著升高(P<0.05),24 h UTP显著降低(P<0.05),KW/BW显著降低(P<0.05),同时miR-221表达被抑制(P<0.05),Timp3的mRNA与蛋白表达水平上调(均P<0.05).miR-221抑制剂干预DN小鼠8周后,与DC组比较,miR-221表达被抑制(P<0.05),Timp3的mRNA与蛋白水平升高(P<0.05),血清肌酐水平有所下降,但差异无统计学显著性(P>0.05),而24 h UTP水平显著降低(P<0.05),KW/BW显著降低(P<0.05).pCMV-ADPN转染和抑制miR-221后,肾组织病理损伤均明显减轻,表现为肾小管和肾小球损伤明显减轻,系膜细胞增生减少.结论:ADPN对DN小鼠的肾脏具有一定的保护作用,其机制与调控miR-221/Timp3信号有关.