槲皮素对大鼠肾小管上皮细胞增殖、线粒体功能的影响及其机制研究

目的:探讨槲皮素对大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)增殖、线粒体功能的影响及PI3K/AKT通路的调控作用.方法:体外培养NRK-52E细胞,将其分为空白对照组(N组)、0.4mmol/L尿酸组(U组)、0.4mmol/L尿酸+15mg/L槲皮素组(Q组),每组设6个复孔.培养24h后,倒置显微镜观察细胞的形态,MTT法测定各组细胞的增殖率,荧光探针DCFH-DA及流式细胞术检测细胞内活性氧(ROS)的生成情况,JC-1染色法于荧光显微镜下观察线粒体膜电位变化,Western blot检测磷脂酰肌醇激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)及雷帕霉素靶蛋白(mTOR)蛋白的表达.结果:与N组相比,U组NRK-52E细胞的增殖率下降(P＜0.01),Q组的增殖率较U组明显上升(P＜0.05).与U组相比,Q组细胞ROS生成减少(P＜0.01),线粒体膜电位增加(P＜0.01).与U组相比,Q组AKT磷酸化水平增加,PI3K、AKT、mTOR的表达亦增加(P＜0.01).结论:槲皮素对尿酸致NRK-52E细胞凋亡有保护作用,其保护作用可能是通过PI3K/AKT信号途径改善线粒体功能,从而减少细胞凋亡,促进细胞增殖来实现的.