稳定内皮和周细胞微管改善脊髓损伤中微循环障碍的作用及其机制

目的 探讨稳定内皮细胞和周细胞微管改善脊髓损伤(SCI)中微循环障碍的作用及其机制.方法 培养大鼠脑微血管内皮细胞和周细胞,建立糖氧剥夺(OGD)模型,采用CCK-8法检测细胞活力,采用免疫荧光和Western blotting分别检测α-微管蛋白(α-tubulin)表达;建立脊髓横断损伤模型(n=36),采用免疫荧光检测大鼠内皮细胞抗原1(RECA-1)及血小板衍生生长因子受体β(PDGFRβ)表达,采用Western blotting检测血管内皮生长因子A(VEGFA)、VEGF受体2(VEGFR2)、血小板衍生生长因子B(PDGFB)、PDGFRβ、血管生成素1(Ang-1)、特异性酪氨酸激酶受体2(Tie-2)等蛋白表达.结果 OGD组细胞活性显著低于对照组,且具有时间依赖性;埃博霉素B(Epo B)组细胞活性显著高于OGD组;OGD致微管断裂,且随时间延长断裂愈加明显;Epo B组微管比OGD组趋于稳定,断裂减轻.SCI组RECA-1和PDGFRβ表达水平明显低于假手术组,Epo B治疗组RECA-1和PDGFRβ表达水平显著高于SCI组,VEGFA、VEGFR2、PDGFB、PDGFRβ、Ang-1表达水平明显高于SCI组.结论 脊髓损伤可导致血管和周细胞减少及微循环障碍,这与细胞微管破坏相关;稳定微管治疗可保护周细胞和微血管,促进微循环重建,建立有利于脊髓损伤修复的微环境.