Bax抑制因子1对人妊娠期肝内胆汁淤积症胎盘滋养细胞凋亡的影响及其机制

目的:探讨Bax抑制因子1(BI-1)对人妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)胎盘滋养细胞凋亡的影响及其机制.方法:选取2018年5月至2019年5月新疆维吾尔自治区人民医院产科住院分娩的ICP孕产妇15例为研究对象,设为ICP组,另取15例正常孕产妇作为对照组,免疫组织化学显色检测ICP组和对照组孕妇胎盘组织BI-1的表达;体外培养滋养细胞系HTR8,应用不同浓度(10、50、100μmol/L)的牛磺胆酸(TCA)进行刺激,RT-PCR及免疫印迹检测HTR8细胞BI-1 mRNA及蛋白的表达;用过表达BI-1的慢病毒载体感染HTR8细胞,荧光显微镜及RT-PCR检测感染效率后,将细胞分为对照组(NC组)、TCA处理的感染LV-NC细胞组(TCA+LV-NC组)、TCA处理感染LV-BI-1细胞组(TCA+LV-BI-1组);分别用Annexin V-FITC、透射电镜及JC-1流式线粒体膜电位检测试剂盒检测3组滋养细胞凋亡、线粒体超微结构及线粒体膜电位;免疫印迹检测3组细胞Cyt-C及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及cleaved caspase-3的表达.结果:与对照组相比,ICP组胎盘组织BI-1表达显著降低;体外实验结果显示,TCA能够显著降低HTR8细胞BI-1 mRNA及蛋白表达,且呈浓度依赖性;应用慢病毒成功建立过表达BI-1的滋养细胞系.与NC组细胞相比,TCA+LV-NC组与TCA+LV-BI-1组细胞凋亡率和线粒体损伤水平均显著增加,线粒体膜电位明显降低;而与TCA+LV-NC组相比,LV+BI-1组细胞凋亡率与线粒体损伤水平均明显降低,线粒体膜电位显著增加;过表达BI-1能够有效阻止TCA导致的滋养细胞Bcl-2/Bax比值的降低,以及线粒体Cyt-C的释放及cleaved caspase-3表达的增加.结论:BI-1在ICP患者胎盘组织中的表达显著降低,而体外过表达BI-1可能通过上调滋养细胞中Bcl-2/Bax比值,抑制细胞线粒体膜电位降低及结构损伤,从而减少Cyt-C的释放,最终降低凋亡蛋白caspase-3活化而改善TCA诱导的凋亡作用.