lncRNA HAGLR通过靶向miR-93-5p调控胃癌细胞增殖和迁移的分子机制
International Journal of Surgery(2021)
Abstract
目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)HAGLR通过靶基因微小RNA(miR)-93-5p调控胃癌细胞增殖和迁移的分子机制。方法:采用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测胃癌细胞株(HS-746T、BGC823、SGC7901、MGC803)和正常胃黏膜上皮细胞(GES-1)中HAGLR的表达水平。选择HAGLR表达最低的细胞株分别转染阴性对照质粒(阴性对照组)和HAGLR高表达质粒(HAGLR组)。分别采用MTS法和划痕愈合实验检测转染后细胞的增殖情况和迁移能力。生物信息学软件miRcode数据库预测HAGLR的靶基因,双荧光素酶报告基因实验验证HAGLR与靶基因的结合。qRT-PCR检测HAGLR靶基因的表达。Western blot检测Hippo信号通路的表达。采用SPSS 21.0软件进行统计分析,组间比较应用 t检验,多组间比较应用单因素方差分析。 结果:与GES-1细胞相比,胃癌细胞株HAGLR的表达水平均降低(均 P<0.05),HAGLR表达最低的细胞株是SGC7901细胞( P<0.01)。HAGLR组和阴性对照组SGC7901细胞中HAGLR表达分别为1.03±0.13和9.75±1.10,阴性对照组HAGLR的表达水平明显低于HAGLR组( t=7.87, P<0.01)。与阴性对照组比较,HAGLR组SGC7901细胞的吸光度值明显降低( P<0.05),划痕愈合率明显减少( P<0.01)。miRcode数据库显示HAGLR与miR-93-5p存在互补结合位点。双荧光素酶报告基因实验显示HAGLR可互补结合miR-93-5p( P<0.01)。与阴性对照组比较,HAGLR组SGC7901细胞中miR-93-5p表达明显降低( P<0.01),Hippo信号通路蛋白表达明显降低(均 P<0.01)。 结论:HAGLR在胃癌细胞株中呈低表达,HAGLR通过靶向负调控miR-93-5p抑制胃癌SGC7901细胞的增殖和迁移能力。
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Key words
Stomach neoplasms,Cell Proliferation,Cell Movement,Non-coding RNA
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