原花青素对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、迁移及TLR4/MyD88通路的影响

目的:探讨原花青素对瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFs)增殖、迁移及TLR4/MyD88通路的影响.方法:体外培养96孔(5×103个/孔)KFs细胞,用MTT法确定原花青素的半数抑制浓度;96孔(5×103个/孔)KFs细胞随机分为对照组、原花青素低剂量组、原花青素中剂量组和原花青素高剂量组,每组24孔(5×103个/孔).对照组细胞不进行处理;原花青素低、中、高剂量组分别用终浓度为25、50、100mg/L的原花青素干预KFs细胞.24h后分别采用MTT法、流式细胞术和细胞划痕法检测KFs细胞增殖率、凋亡率和迁移能力;酶联免疫吸附法检测KFs细胞中IL-23、IL-17A和IL-6水平;实时荧光PCR和Western Blot法检测KFs细胞中TLR4、MyD88和NF-κB mRNA及蛋白水平.结果:随着原花青素浓度增加,KFs细胞增殖率降低,50mg/L为半数抑制浓度.与对照组比较,其余各组细胞迁移距离降低,细胞凋亡率增加,细胞中IL-23、IL-17A和IL-6,TLR4、MyD88和NF-κB mRNA及蛋白水平降低,且随着原花青素剂量增加,各原花青素剂量组各指标变化呈剂量反应关系,差异有统计学意义(P<0.05).结论:原花青素能抑制KFs细胞增殖和迁移,促进KFs细胞凋亡,其机制可能与抑制TLR4/MyD88通路的激活有关.