膜泡分拣蛋白72在肝癌组织的表达及其对肝癌细胞表型的影响

目的:探讨膜泡分拣蛋白72(VPS72)在肝癌组织和对应癌旁组织的表达及临床病理意义，观察其对细胞增殖、迁移能力的影响。方法:选取2018年9月至2020年9月来自河南大学河南省人民医院60例肝癌组织及对应的癌旁组织标本，肝癌组织划分为中心组，取距离癌组织边缘2 cm处标本划分为癌旁组。免疫蛋白印迹法(Western blot)及免疫荧光法检测中心组和癌旁组中VPS72蛋白的表达水平及分布，分析其与年龄、性别、肿瘤大小、数目、分期、分化程度、有无脉管癌栓、包膜侵犯等临床病理参数之间的关系；小干扰RNA(siRNA)降低肝癌细胞株Huh-7中VPS72的表达，分为实验组和对照组；划痕实验、Transwell实验检测其对Huh-7迁移能力的影响；细胞计数试剂盒(CCK-8)实验和平板克隆实验检测Huh-7增殖能力。组间比较采用配对样本 t检验和 χ2检验。 结果:VPS72在癌组织中相对表达量为0.900±0.511，明显高于对应癌旁组织表达量(0.729±0.643)，差异有统计学意义( t＝2.027， P<0.05)。其表达量与肿瘤的分化程度、大小、脉管癌栓、细胞增殖抗原-67(Ki-67)和分期明显相关( χ2＝5.621、4.855、4.275、8.418、7.202， P<0.05)。划痕实验表明24、48 h实验组迁移细胞数[(38.330±3.512)、(66.670±5.508)个]低于对照组[(78.670±2.517)、(165.670±5.033)个]，差异有统计学意义( t＝14.162、16.275， P<0.05)。Transwell实验显示穿孔细胞数实验组(32.333±3.512)个，低于对照组[(52.667±2.082)个]，差异有统计学意义( t＝7.625， P<0.05)。CCK-8实验显示0 h实验组吸光度值(0.235±0.047)较对照组(0.237±0.068)无明显变化，差异无统计学意义( t＝0.020， P>0.05)。24、48 h实验组 A值(0.539±0.300、0.815±0.038)低于对照组(0.683±0.100、1.415±0.131)，差异有统计学意义( t＝4.654、7.373， P<0.05)。平板克隆实验显示实验组细胞团数量为(50.222±6.222)个，低于对照组[(71.560±7.038)个]，差异有统计学意义( t＝7.875， P<0.01)。 结论:肝癌组织中VPS72蛋白表达量明显高表达，且与肿瘤的分化程度、大小、脉管癌栓、Ki-67和分期呈正相关，降低VPS72的表达能够明显抑制Huh-7细胞株增殖和迁移能力。