人抑瘤素M对人肺癌细胞生长抑制效应的体外实验研究

目的:探讨携带人抑瘤素M(OSM)重组腺病毒表达载体对A549人肺癌细胞生长的影响和抗肿瘤机制。方法:用最佳感染复数的病毒感染A549细胞，用荧光显微镜、反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)法检测OSM在人肺癌细胞中的转录和表达；荧光显微镜观察A549细胞的形态学改变；噻唑蓝(MTT)法和FCM检测Ad-OSM对A549细胞的生长抑制和细胞凋亡的影响；半定量RT-PCR法检测OSM基因的表达对A549细胞中的B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、p53基因表达的影响。多组间均数比较采用单因素方差分析(One-way ANOVA)，两两比较采用 q检验。 结果:Ad-OSM组与Ad组和磷酸盐缓冲液(PBS)对照组比较，Ad-OSM对A549人肺癌细胞有明显生长抑制作用(-0.250±0.021， t＝12.012， P<0.05；-0.220±0.016， t＝13.470， P<0.05)，Ad组和PBS对照组差异无统计学意义(2.333±2.097， t ＝1.113， P>0.05)。用流式细胞仪检测细胞凋亡，Ad-OSM能明显诱导A549细胞凋亡，其中凋亡率可达20.6%，与Ad(2.5%)组和PBS组比较差异有统计学意义(17.800±0.627， t＝28.380， P<0.05；17.530±0.667， t＝26.335， P<0.05)。RT-PCR和Western blot法检测到OSM基因在A549细胞成功转录和表达；OSM基因表达对A549细胞增殖有明显抑制作用，并可诱导人肺癌细胞凋亡，OSM基因可通过上调细胞中bax、p53和下调bcl-2基因表达诱导细胞凋亡。 结论:OSM基因可明显抑制A549人肺癌细胞生长，诱导其凋亡，该现象可能是通过改变bax、bcl-2、p53基因表达水平来发挥抗肿瘤作用。