人内源性反转录病毒-H长末端重复关联蛋白2在人非小细胞肺癌细胞株中的表达及其生物学功能

目的:探讨人内源性反转录病毒-H长末端重复关联蛋白2(HHLA2)在人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株A549、H1975和SK-MES-1中的表达及其生物学功能。方法:利用癌症基因组图谱(TCGA)数据库采用Log-rank检验分析HHLA2 mRNA在NSCLC组织中的表达水平对患者预后的预测价值。利用RNA干扰(RNAi)技术构建HHLA2表达稳定下调的人NSCLC细胞株，通过细胞增殖实验、划痕实验及Transwell侵袭实验观察HHLA2表达下调对人NSCLC细胞株生物学功能的影响，组间比较采用 t检验。 结果:TCGA数据库结果显示，HHLA2 mRNA表达水平低的肺癌患者的总生存期(OS)显著高于HHLA2 mRNA表达水平高的患者(肺腺癌：Log-rank P＝0.082，肺鳞癌：Log-rank P＝0.021)。富集分析结果显示HHLA2可能与NSCLC细胞的增殖、迁移和侵袭能力相关。实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)结果显示，3种细胞株中LV-shHHLA2组HHLA2 mRNA和蛋白表达水平均显著低于LV-NC组。细胞计数试剂盒(CCK-8)增殖实验显示，下调HHLA2的表达可显著降低3种细胞的增殖能力(A549：48 h：0.475±0.014比0.600±0.030， t＝3.813， P<0.05；72 h：0.658±0.044比0.911±0.039， t＝4.336 P<0.05；H1975：48 h：0.414±0.026比0.550±0.026， t＝3.669， P<0.05；72 h：0.645±0.049比0.926±0.026， t＝5.076， P<0.01；SK-MES-1：48 h：0.387±0.043比0.606±0.037， t＝3.870， P<0.05；72 h：0.675±0.044比0.971±0.045， t＝4.717， P<0.01)；划痕实验显示，下调HHLA2的表达可显著降低3种细胞的迁移能力(A549：0.489±0.046比1.000±0.033， t＝8.975， P<0.001；H1975：0.242±0.060比1.000±0.028， t＝11.390， P<0.001；SK-MES-1：0.403±0.071比1.000±0.092， t＝5.150， P<0.001)；Transwell侵袭实验显示，下调HHLA2的表达可显著降低3种细胞的侵袭能力[A549：(150.333±7.881)个比(226.000±6.429)个， t＝7.440 P<0.01；H1975：(92.000±11.790)个比(203.333±7.839)个， t＝7.864， P<0.01；SK-MES-1：(95.333±14.881)个比(201.000±16.643)个， t＝4.733， P<0.01]。 结论:干扰NSCLC细胞中HHLA2的表达可降低其增殖、迁移和侵袭能力。