DLEU2下调miR-374a-5p对肝癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响

Chinese Journal of Gerontology(2021)

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摘要
目的 探讨DLEU2对肝癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及潜在的作用机制.方法 运用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测肝癌细胞HepG2、BEL-7402和正常肝细胞HL-7702中DLEU2和miR-374a-5p的表达水平;将miR-NC组(转染miR-NC)、miR-374a-5p组(转染miR-374a-5pmimics)、pcDNA3.1组(转染pcDNA3.1)、pcDNA3.1-DLEU2组(转染pcDNA3.1-DLEU2)、si-NC组(转染si-NC)、si-DLEU2组(转染si-DLEU2)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、anti-miR-374a-5p组(转染anti-miR-374a-5p)、miR-NC+WT-DLEU2组(共转染miR-NC和WT-DLEU2)、miR-NC+MUT-DLEU2组(共转染miR-NC和MUT-DLEU2)、miR-374a-5p+WT-DLEU2组(共转染miR-374a-5p和WT-DLEU2)、miR-374a-5p+MUT-DLEU2组(共转染miR-374a-5p和MUT-DLEU2)、pcDNA3.1-DLEU2+miR-NC组(共转染pcDNA3.1-DLEU2和miR-NC)、pcDNA3.1-DLEU2+miR-374a-5p组(共转染pcDNA3.1-DLEU2和miR-374a-5p)均用脂质体法转染至HepG2细胞;采用MTT法检测各组细胞增殖;Transwell检测各组细胞迁移和侵袭;流式细胞术检测各组细胞的凋亡;Western印迹检测蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性.结果 相较于正常肝细胞HL-7702,肝癌细胞HepG2、BEL-7402中DLEU2 mRNA的表达水平显著降低(P<0.05);过表达DLEU2、抑制表达miR-374a-5p均可抑制HepG2细胞增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡,抑制Bcl-2、N-cad-herin蛋白的表达,促进Bax、E-cadherin蛋白的表达.DLEU2靶向调控miR-374a-5p的表达.过表达miR-374a-5p能逆转DLEU2对肝癌细胞HepG2增殖、迁移、侵袭的抑制和凋亡的促进作用.结论 长链非编码RNA DLEU2可抑制肝癌细胞HepG2的增殖、迁移和侵袭,促进其凋亡,其机制可能与靶向miR-374a-5p基因有关,将为肝癌的预防和治疗提供新靶点.
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