miRNA-216b通过靶向调控Beclin1对顺铂诱导的胃癌细胞自噬及凋亡的影响

Chinese Journal of Integrated Traditional and Western Medicine on Digestion(2021)

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Abstract
目的:探究miRNA-216b(miR-216b)对顺铂处理的胃癌细胞的影响及其可能的作用机制.方法:体外培养人胃黏膜细胞系GES-1、人胃癌细胞系SGC7901和胃癌顺铂耐药细胞系SGC7901/DDP,将SGC7901/DDP细胞随机分为空白对照组、agomir-NC+ oe-NC组、agomir-miR-216b+ oe-NC组、agomir-miR-216b+ oe-Bec-lin1组,按照分组进行细胞转染,荧光素酶报告实验检测miR-216b与Beclin1的靶向结合;qPCR检测细胞miR-216b的表达;Western blot检测细胞Beclin1、LC3、p62、Bax和Bcl-2蛋白表达;CCK-8检测细胞活力;克隆形成实验检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡.结果:与GES-1组比较,SGC7901组细胞中miR-216b的表达显著降低(P<0.05),Beclin1蛋白表达显著升高(P<0.05);与SGC7901组比较,SGC7901/DDP组细胞中miR-216b的表达显著降低(P<0.05),Beclin1蛋白表达显著升高(P<0.05).miR-216b靶向调控Beclin-1,与空白对照组比较,agomir-NC+ oe-NC组SGC7901/DDP细胞中各指标差异无统计学意义;与agomir-NC+ oe-NC组比较,ag-omir-miR-216b+oe-NC组SGC7901/DDP细胞中miR-216b的表达显著升高(P<0.05),Beclin1、LC3Ⅱ/LC3 Ⅰ和Bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.05),细胞活力和克隆数显著降低(P<0.05),细胞凋亡率、Bax和p62蛋白表达显著升高(P<0.05);与agomir-miR-216b+ oe-NC组比较,agomir-miR-216b+ oe-Beclin1组SGC7901/DDP细胞中Beclin1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和Bcl-2蛋白表达显著升高(P<0.05),细胞活力和克隆数显著升高(P<0.05),细胞凋亡率、Bax和p62蛋白表达显著降低(P<0.05).结论:miR-216b通过靶向调控Beclin1抑制自噬并促进凋亡,增加SGC7901/DDP细胞顺铂敏感性.
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