低分子肝素改善子痫前期中的内皮损伤的机制研究

目的 探讨低分子肝素对子痫前期(preeclampsia,PE)患者胎盘组织中血管内皮细胞的Notch信号通路配体Delta样配体4(Delta-like ligand 4,DLL4)表达的影响,及其对内皮细胞损伤的作用及相关机制.方法 选取2018年3月至2019年4月在海南医学院第二附属医院妇产科住院分娩的早发型重度PE患者60例,按随机数字表法将其分为PE组(单用硫酸镁)与低分子肝素组(联合使用硫酸镁与低分子肝素),各30例.选取同期正常妊娠剖宫产妇女30例为对照组.免疫组织化学法观察对比3组产妇胎盘组织中DLL4的表达水平;ELISA检测3组孕产妇外周血中内皮损伤相关细胞因子内皮素-1(endothelian-1,ET-1)、可溶性血管细胞黏附分子-1(soluble vascular cell adhesion molecule-1,sVCAM-1)的表达;体外培养脐静脉内皮细胞,预先应用低分子肝素进行干预,再应用PE患者血清进行刺激,TUNEL染色,内皮细胞通透性检测观察低分子肝素对PE血清诱导的内皮细胞凋亡,内皮细胞完整性的影响;Western blot检测低分子肝素对PE血清诱导的内皮细胞中凋亡蛋白Bcl-2、Bax、Cleaved caspase-3表达的影响,并使用Notch信号通路阻滞剂MK-0752进行干预,观察低分子肝素是否通过Notch/DLL4信号通路抑制PE血清诱导的内皮细胞凋亡.结果 DLL4主要表达于胎盘组织的血管内皮细胞中,且与对照组(63.5％)相比,PE组及低分子肝素组的胎盘组织中DLL4的表达阳性率(分别为14.7％、36.9％)均明显更低,而低分子肝素组较PE组中DLL4的表达明显更高,差异均有统计学意义(P＜0.05);与对照组相比,PE组及低分子肝素组产妇血清中ET-1、sVCAM-1表达水平明显更高;与PE组相比,低分子肝素组产妇血清中上述细胞因子的表达水平明显更低,差异均有统计学意义(P＜0.05).预先使用低分子肝素处理可显著抑制PE血清诱导的内皮细胞凋亡,并改善PE血清对其的通透性影响,从而保护内皮细胞的完整性.Western blot结果表明,低分子肝素能够通过促进抗凋亡相关蛋白Bcl-2的表达,抑制促凋亡蛋白Bax、Cleaved caspase-3的表达来改善PE血清对内皮细胞损伤,而使用Notch信号通路抑制剂MK-0752能显著逆转低分子肝素对凋亡相关蛋白的上述影响.结论 联合使用低分子肝素能够通过促进胎盘组织内皮细胞中DLL4的表达,其可能通过Notch/DLL4信号通路抑制内皮细胞的凋亡,从而保护内皮细胞的完整性,改善PE的临床预后.