干扰hTERT增强光动力疗法诱导宫颈癌细胞凋亡的体外实验

目的:观察干扰hTERT对TMPyP4光动力疗法诱导宫颈癌细胞发生凋亡的作用,并探索其机制.方法:筛选hTERT的有效干扰片段,并将其转染至宫颈癌Caski细胞和接受TMPyP4-PDT的Caski细胞.AnnexinV-PE/7-AAD双染试剂盒检测细胞凋亡率,荧光实时定量PCR法、Western blot分别检测Bcl-2、Bax、caspase-3、SP-1基因mRNA和蛋白水平的表达.结果:成功筛选sh-4作为有效干扰片段用于后续实验,接受TMPyP4-PDT的Caski细胞稳定转染此片段后,细胞凋亡率明显升高,Bcl-2、SP-1基因在mRNA水平和蛋白水平表达均减少,Bax、caspase-3基因在mRNA水平和蛋白水平表达均增加.结论:干扰hTERT基因可以增强光动力疗法(PDT)的效果,可能机制是通过降低靶基因Bcl-2、SP-1表达和增加Bax、caspase-3表达,进而加速细胞凋亡.