癌相关成纤维细胞对喉癌细胞系Hep-2生物学行为影响的体外研究

目的 探讨癌相关成纤维细胞(CAFs)在体外的分泌功能及对喉癌细胞Hep-2生物学行为的影响.方法 提取江西省肿瘤医院2016-09-09 1例喉鳞状细胞癌手术患者的癌组织及癌旁组织,进行喉癌CAFs及正常成纤维细胞(NFs)的原代培养.ELISA试剂盒测定CAFs和NFs培养上清液中MMP-2、MMP-9的浓度.制备CAFs及NFs条件培养基分别对Hep-2细胞进行培养,CCK-8法检测细胞的增殖情况.采用Transwell法,Hep-2细胞分别与CAFs及NFs进行共培养,设实验组(CAFs共培养组)、对照组(NFs共培养组)和空白组(DMEM培养组),流式细胞法检测Hep-2细胞凋亡率,Transwell侵袭小室法检测Hep-2细胞的侵袭能力.采用SPSS 15.0对数据进行统计学分析.结果 MMP-2于CAFs培养上清液中的浓度为(3.40±0.22)ng/mL,于NFs培养上清液中的浓度为(2.52±0.19)ng/mL,差异有统计学意义,t=-5.246,P=0.006.MMP-9于CAFs培养上清液中的浓度为(164.88±6.54)pg/mL,于NFs培养上清液中的浓度为(114.16±4.48)pg/mL,差异有统计学意义,t=-11.087,P＜0.001.CCK-8检测各培养基组的A450值,各培养基组间A450值差异有统计学意义,F培养基=13.977,P培养基＜0.001,显示与NFs条件培养基组相比,CAFs条件培养基可促进Hep-2细胞的增殖.流式细胞法检测实验组Hep-2细胞凋亡率为(7.17±1.24)％,而对照组和空白组Hep-2细胞凋亡率则分别为(2.45±0.73)％、(2.05±0.74)％,差异有统计学意义,F=27.664,P=0.001.Transwell法共培养后,检测各组Hep-2穿膜细胞数,实验组为(347.80±23.73)个,对照组和空白组分别为(254.00±46.11)、(191.40±23.67)个,差异有统计学差异,F=28.599,P＜0.001.结论 CAFs对Hep-2细胞具有促进增殖、增强侵袭能力以及诱导凋亡的作用,且CAFs中MMP2、MMP-9分泌性表达的增加可能有助于增强Hep-2细胞的侵袭能力.