MAGE-A3表达对膀胱癌细胞增殖及侵袭的影响及其机制

目的 研究膀胱癌细胞中黑色素瘤抗原A3 (MAGE-A3)表达及其对膀胱癌细胞增殖及侵袭能力的影响和可能机制.方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和免疫细胞化学染色检测膀胱癌TCC-SUP和EJ28细胞中MAGE-A3 mR-NA和蛋白的表达.采用小干扰RNA(siRNA)敲减MAGE-A3的表达后,通过克隆形成实验、MTT实验及侵袭实验检测其对TCC-SUP细胞的存活、增殖及侵袭能力的影响.蛋白质印迹法检测p21蛋白在TCC-SUP细胞中的表达变化.结果 qRT-PCR结果显示,MAGE-A3 mRNA在TCC-SUP和EJ28细胞中相对表达水平分别为0.188±0.036和0.005±0.001,组间均值差异有统计学意义,t=11.93,P＜0.01.免疫细胞化学染色结果显示,MAGE-A3蛋白在TCC-SUP和EJ28细胞中的阳性细胞数分别为80.33±3.18和6.33±0.88,组间均值差异有统计学意义,t=22.43,P＜0.01.TCC-SUP细胞分别转染si-Random和si-MAGE-A3后,MAGE-A3 mRNA在si-Random组和si-MAGE-A3组的相对表达量分别为0.198±0.011和0.074±0.005,组间均值差异有统计学意义,t=13.83,P＜0.01.MAGE-A3蛋白在si-Random组和si-MAGE-A3组的阳性细胞数分别为78.33±4.91和14.33±2.02,组间均值差异有统计学意义,t=12.04,P＜0.01.克隆形成实验结果显示,si-Random组和si-MAGE-A3组TCC-SUP细胞克隆数分别为112.00±2.31和87.67±7.80,组间均值差异有统计学意义,t=5.90,P＜0.05;MTT实验结果显示,si-Random组和si-MAGE-A3组TCC-SUP细胞的增殖能力分别为1.000±0.094和0.554±0.032,组间均值差异有统计学意义,t=15.54,P＜0.01;侵袭实验结果显示,si-Random组和si-MAGE-A3组TCC-SUP细胞穿膜细胞数为78.67±2.91和56.00±4.59,组间均值差异有统计学意义,t=13.43,P＜0.01.蛋白质印记结果显示,siMAGE-A3组p21蛋白的表达水平(0.528±0.060)较si-Random组(0.121±0.019)增加,t=16.47,P＜0.01.结论 MAGE-A3在膀胱癌细胞TCC-SUP中高表达,其可通过下调p21蛋白的表达而促进膀胱癌细胞的生长.