RNA干扰细胞分裂周期蛋白6基因表达对结直肠癌细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响及其机制研究

目的 探讨RNA干扰细胞分裂周期蛋白6(CDC6)基因表达对结直肠癌细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响及其作用机制.方法 采用蛋白质印迹法(Western blot)检测永生化结直肠细胞株(FHC)、结直肠癌细胞株(SW620、LOVO、HT29)中CDC6蛋白的表达情况.利用Lipofectamine 2000将CDC6 siRNA转染至SW620细胞,以转染si-con的SW620细胞作为阴性对照,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Transwell小室实验检测细胞侵袭和迁移情况.采用Western blot检测Janus激酶2(JAK2)、磷酸化-JAK2(p-JAK2)、信号转导及转录激活因子3(STAT3)及磷酸化-STAT3(p-STAT3)蛋白的表达情况.采用JAK2/STAT3信号通路激活剂colivelin处理转染CDC6 siRNA的SW620细胞,观察其对SW620细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响.结果 永生化结直肠细胞株FHC中CDC6蛋白的相对表达量低于结直肠癌细胞株SW620、LOVO、HT29,差异均有统计学意义(P﹤0.05).转染CDC6 siRNA能够抑制SW620细胞增殖,促进细胞凋亡,减少侵袭细胞数目、迁移细胞数目,降低p-JAK2、p-STAT3蛋白的相对表达量,而对JAK2、STAT3蛋白的相对表达量无明显影响.采用colivelin激活JAK2/STAT3信号通路可以逆转CDC6 siRNA对SW620细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响.结论 转染CDC6 siRNA可通过下调JAK2/STAT3信号通路,抑制结直肠癌细胞的增殖、侵袭和迁移,并诱导细胞凋亡.