HMGB1在脑胶质瘤中的表达及其对胶质瘤细胞生物学功能的影响
Journal of Modern Oncology(2021)
Abstract
目的:检测高迁移率族蛋白1(high mobility group box-1,HMGB1)在胶质瘤组织和细胞中的表达情况,了解HMGB1对胶质瘤细胞增殖、侵袭迁移以及细胞周期的影响.方法:将HMGB1 siRNA真核表达质粒在脂质体介导下转染胶质瘤细胞U373、U87(HMGB1 siRNA组),以转染无关序列siRNA质粒的细胞(negative control,NC)和未转染的胶质瘤细胞(Control,Con)作为对照.采用RT-PCR和Western blot检测HMGB1 mRNA和蛋白表达,通过CCK-8实验、Transwell实验和细胞划痕实验分别检测胶质瘤细胞增殖、侵袭和迁移能力,用流式细胞仪检测胶质瘤细胞周期的变化.结果:HMGB1 mRNA在胶质瘤组织和细胞水平上都较非肿瘤性脑组织和正常胶质细胞明显高表达,差异有统计学意义(P<0.05),CCK-8和划痕实验提示HMGB1 siRNA组细胞增殖和迁移能力受到明显抑制(P<0.05),Transwell实验显示HMGB1 siRNA组穿膜侵袭到基质胶的细胞数明显低于Con组和NC组,细胞侵袭能力减弱(P<0.05),流式细胞分析提示HMGB1 siRNA组位于S期细胞比例较Con和NC组明显减少(P<0.05),提示细胞周期发生S期阻滞.结论:应用RNAi能有效抑制HMGB1基因表达,HMGB1低表达后能抑制胶质瘤细胞增殖、侵袭和迁移,并使得细胞周期中进入S期的细胞比例明显减少,细胞周期发生阻滞,这可能为胶质瘤的基因治疗提供了新思路.
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