异鼠李素通过减轻氧化应激延缓D-半乳糖诱导的人脐静脉内皮细胞衰老

目的:探讨沙棘中的重要成分异鼠李素(ISO)对细胞衰老的影响及机制.方法:采用D-半乳糖(D-Gal)诱导细胞衰老模型,取20 ～ 23代的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分为4组:对照组、D-Gal组、D-Gal+ISO组(5μmol/L)、D-Gal+ISO组(10 μmo]/L).其中D-Gal浓度为10 g/L,干预时间为72 h.采用CCK-8试剂盒检测各组细胞活力;衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色试剂盒检测细胞衰老状态;各相关试剂盒检测细胞总活性氧(ROS)水平、丙二醛(MDA)含量、总超氧化物歧化酶(SOD)活性和过氧化氢酶(CAT)活性.Western blot法检测衰老标志蛋白p21、p27和核因子NF-E2相关因子2(Nrf2)及其下游蛋白表达水平.结果:ISO浓度≤10μmol/L时对HUVEC无明显毒性作用;与对照组比较,D-Gal能够诱导细胞衰老指标SA-β-Gal活性增加(P＜0.05);提高p21、p27表达水平,提高细胞总ROS水平和MDA含量,降低总SOD和CAT活性,降低Nrf2及下游蛋白表达水平(P＜0.05).与D-Gal组比较,ISO能够降低细胞SA-β-Gal活性,抑制p21、p27表达,降低细胞总ROS水平和MDA含量,提高总SOD和CAT活性,增强Nrf2及下游蛋白表达(P＜0.05).结论:ISO可以通过减轻氧化应激,延缓D-Gal诱导的HUVEC细胞衰老,在此过程中激活Nrf2通路可能是其发挥抗衰老作用的重要机制.