刺芒柄花素通过COX-2/cyclin D1轴调控肝癌的发生和发展

目的:分析环氧合酶2(cyclooxygenase-2,COX-2)的表达与肝癌患者临床病理特征及预后的关系,探讨刺芒柄花素(formononetin,FOR)在肝癌发生和发展中的作用及其机制.方法:收集2021年1～5月河北医科大学第四医院20例手术治疗肝癌患者的癌和相应的癌旁组织、60例手术治疗肝癌患者的临床资料,以及人肝癌细胞系HepG2和Bel-7402.用qPCR法和免疫组织化学染色法检测肝癌组织中COX-2的表达,分析其表达与患者临床病理特征和预后的关系.构建小鼠二乙基亚硝胺诱导肝癌模型,验证FOR对肝癌发病的影响.用0.003、0.006 μmol/ml的FOR分别处理肝癌细胞HepG2和Bel-7402 48 h后,用CCK-8法和流式细胞术检测FOR对肝癌细胞增殖和周期的影响,qPCR和WB法检测细胞中COX-2、CDK4、CDK6和cyclinD1表达的变化.结果:肝癌组织中COX-2 mRNA表达水平显著高于癌旁组织(P＜0.01),COX-2蛋白表达阳性率为68.3％(41/60);COX-2表达阳性与患者TNM分期晚、肿瘤大、生存期短有关(均P＜0.05).诱导小鼠肝癌模型中,FOR处理组小鼠肝癌的发生率显著降低、肝癌组织中COX-2表达显著降低(均P＜0.05).FOR处理可显著抑制HepG2和Bel-7402细胞的增殖能力,增加G0/G1期细胞比例、降低S和G2期细胞比例(均P＜0.05),抑制细胞中COX-2和cyclinDl的表达(均P＜0.01).结论:COX-2表达阳性肝癌患者临床分期较晚且预后较差,FOR可通过抑制COX-2和cyclin D1表达来降低肝癌的发生和发展.