海洋真菌Aspergillus sp.XBB-4中生物碱类代谢产物3-羟基-β-咔啉诱导人肝癌细胞凋亡及其机制

目的 研究海洋真菌Asrgillus sp.XBB-4中生物碱类代谢产物3-羟基-β-咔啉诱导人肝细胞癌细胞凋亡及其作用机制.方法 不同浓度的3-羟基-β-咔啉处理肝细胞癌细胞,MTT法和流式细胞术分别检测3-羟基-β-咔啉对细胞增殖和凋亡的影响,Western blot检测DNA修复酶(PARP)切割,cleaved-caspase3和Bcl2等凋亡相关蛋白和相关通路蛋白ERK、AKT、JNK等磷酸化水平的变化.流式细胞术检测3-羟基-β-咔啉对胞内活性氧(ROS)水平的影响,并检测ROS清除剂对3-羟基-β-咔啉介导的细胞凋亡的影响.结果 3-羟基-β-咔啉显著抑制肝细胞癌细胞HepG2、QGY7701和SMMC7721的增殖,PARP断裂条带明显增加,Cleaved-caspase3蛋白表达上调,抗凋亡蛋白Bcl2表达下调,ERK1/2蛋白磷酸化水平降低.流式细胞术检测发现3-羟基-β-咔啉诱导肝癌细胞凋亡.3-羟基-β-咔啉处理肝癌细胞后胞内ROS水平升高,ROS抑制剂NAC或脂质ROS抑制剂Liproxstatin-1可拮抗3-羟基-β-咔啉诱导的SMMC7721或HepG2细胞的凋亡.结论 3-羟基-β-咔啉能够抑制肝癌细胞增殖,升高细胞ROS水平,诱导细胞凋亡.