RPL34基因敲低对人皮肤鳞状细胞癌SCL-1细胞的影响

Chinese Journal of Dermatology(2021)

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摘要
目的:研究RPL34基因对皮肤鳞状细胞癌(鳞癌)细胞增殖、凋亡的影响。方法:收集2016年1月至2017年1月内蒙古医科大学附属医院皮肤性病科14例皮肤鳞癌和16例正常皮肤组织石蜡标本,通过免疫组化分析组织中RPL34的表达。构建RPL34基因干扰慢病毒,感染皮肤鳞癌SCL-1细胞(shRNA组),通过RT-PCR与Western印迹验证目的基因敲减。感染后72 h,通过流式细胞仪检测敲低RPL34基因后SCL-1细胞周期及凋亡情况,MTT法检测细胞增殖活力。两组间比较采用 t检验或秩和检验。 结果:免疫组化显示,皮肤鳞癌组织细胞质RPL34表达评分(2.143±1.956)高于正常对照组织(0.500±0.516, z=3.53, P< 0.05)。RT-PCR显示,shRNA组SCL-1细胞RPL34mRNA相对表达(0.149±0.016)低于对照组(1±0.018, t=36.95, P< 0.05);Western印迹显示,shRNA组SCL-1细胞RPL34蛋白相对水平明显低于对照组。shRNA组S期细胞比例高于对照组( t=13.76, P< 0.05),G1期细胞比例低于对照组( t=36.62, P< 0.05);shRNA组细胞凋亡率(9.42%±0.16%)高于对照组(4.58%±0.41%, t=19.02, P< 0.05)。MTT结果显示,继续培养120 h,shRNA组细胞活力(0.815±0.005)低于对照组(1.886±0.005, t=265.91, P< 0.05)。 结论:RPL34基因在皮肤鳞癌组织中过表达,敲低RPL34基因可干扰SCL-1细胞周期,降低增殖活力,促进凋亡。
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关键词
Carcinoma, squamous cell,Ribosomal proteins,RNA, small interfering,Cell cycle,Apoptosis,RPL34,SCL-1 cells
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