HPLC-MS/MS法同时测定家兔血浆中5种皂苷成分及药动学研究

目的:建立快速、灵敏的基于固相萃取技术的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)方法,同时测定兔血浆中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd、人参皂苷Re和三七皂苷R1的浓度,并研究家兔肌内注射血塞通注射液后的药动学特征.方法:采用色谱柱CAPCELL CORE C18柱(150 mm×2.1 mm,2.7μm),以水-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速:0.3 ml·min-1.采用多重反应监测(MRM)的扫描方式,离子源为ESI源,选择离子对m/z 823.5+→643.4+(人参皂苷Rg1)、m/z 1131.6+→789.4+(人参皂苷Rb1)、m/z 969.4+→789.5+(人参皂苷Rd)、m/z 969.4+→789.5+(人参皂苷Re)和m/z 955.6+→775.4+(三七皂苷R1)用于定量检测,进样量为1.0μl.家兔血浆样本通过固相萃取法(SPE)处理后进样.结果:5种皂苷质量浓度分别在9.43～603.40 ng·ml-1(人参皂苷Rg1)、10.00～640.04 ng·ml-1(人参皂苷Rb1)、4.91～157.32 ng·ml-1(人参皂苷Rd)、4.84～81.89 ng·ml-1(人参皂苷Re)及4.64～148.70 ng·ml-1(三七皂苷R1)范围内线性良好,日内和日间精密度均小于7.80％,各成分提取回收率介于81.75％～106.83％之间,基质效应介于86.57％～97.40％之间.Rg1主要药动学数半衰期(T1/2)=(2.61±1.05)h,药时曲线下面积(AUC0→∞)=(117.41±17.43)μg·ml-1·h,平均滞留时间(MRT0→∞)=(3.48±0.76)h;Rb1主要药动学参数:T1/2=(18.04±6.77)h,AUC0→∞=(2393.82±594.47)μg·ml-1·h,MRT0→∞=(25.28±8.98)h;Rd主要药动学参数:T1/2=(54.52±23.33)h,AUC0→∞=(1373.61±398.35)μg·ml-1·h,MRT0→∞=(76.64±32.98)h;Re主要药动学参数:T1/2=(2.28±1.24)h,AUC0→∞=(27.27±4.94)μg·ml-1·h,MRT0→∞=(3.47±0.63)h;R1主要药动学参数:T1/2=(2.61±1.05)h,AUC0→∞=(47.14±6.16)μg·ml-1·h,MRT0→∞=(3.55±0.67)h.结论:该方法适用于测定家兔血浆中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd、人参皂苷Re、三七皂苷R1的浓度,并提供药动学参数.药动学参数显示5种皂苷成分在家兔体内呈现两种不同的药动学特征.