金丝桃素介导的光动力学疗法强化CIK对人乳腺癌细胞的抑制作用

目的 探讨金丝桃素(Hyp)介导的光动力学疗法(PDT)联合细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)对人乳腺癌细胞MCF7的抑制作用,并探讨其可能的作用机制.方法 体外培养人CIK细胞,以不同剂量Hyp-PDT诱导MCF7细胞免疫原性细胞死亡(ICD),AnnexinV/PI双染色法检测细胞凋亡,将Hyp-PDT诱导的MCF7细胞上清液加入CIK细胞共培养,流式细胞术检测共培养后CIK细胞免疫表型,噻唑蓝(MTT)实验检测共培养后CIK细胞对MCF7细胞的抑制率,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测Hyp-PDT诱导MCF7细胞ICD后上清液中高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)、热休克蛋白70(HSP-70)和钙网蛋白(CRT)3种损伤相关分子模式(DAMPs)的含量.结果 经不同剂量Hyp-PDT诱导的MCF7细胞呈现不同程度的凋亡,经Hyp-PDT诱导的MCF7细胞的上清液加入CIK细胞共培养使CIK细胞中CD+3、CD+8、CD16/56+效应细胞的比例均明显高于对照组(均P<0.05),共培养后CIK细胞对MCF7细胞的杀伤活性明显高于对照组(均P<0.05),且上清液中HMGB-1、HSP70、CRT含量与Hyp-PDT剂量呈正相关(均P<0.05),而还原型谷胱甘肽(GSH)则可以减轻Hyp-PDT对MCF7细胞造成的损伤.结论 Hyp-PDT与CIK联用具有协同抗肿瘤作用,其效应可能与Hyp-PDT诱导MCF7细胞ICD并释放较高水平的DAMPs分子有关.