苦参碱介导上皮间质转化逆转肺癌A549顺铂耐药株活性研究

目的 探讨苦参碱(MT)逆转肺癌A549顺铂耐药株活性中的作用及分子机制.方法 对数生长期人肺腺癌耐顺铂细胞株A549/DDP细胞,用不同浓度MT(1,4,16,32μmol·L-1)处理,采用噻唑蓝(MTT)法在24 h检测细胞增殖抑制率.将细胞分为空白对照组及MT组(16μmol·L-1),光学显微镜、Transwell及免疫荧光检测两组细胞的细胞形态、侵袭能力、E-钙粘蛋白(E-cadherin)及波形蛋白(vimentin)细胞免疫荧光变化.另将细胞分为空白对照组、MT组(16μmol·L-1MT)、顺铂(DDP)组(3×10-3μmol·L-1DDP)和MT+DDP组(16μmol·L-1MT+3×10-3μmol·L-1DDP),Western blotting法检测上皮间充质转化(EMT)表型相关标志物E-caherin、vimentin、slug、p-p65等蛋白表达,流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 MT能明显抑制A549/DDP细胞的增殖及侵袭能力,MT处理后细胞呈现上皮细胞样形态及上皮表型.此外,与对照组及DDP组比较,MT+DDP组细胞凋亡率明显升高(P<0.05),E-cadherin蛋白表达水平明显升高(P<0.05),vimentin、slug及p-p65蛋白表达水平明显降低(P<0.05).结论 苦参碱具有逆转肺癌顺铂耐药的作用,其机制与抑制肺癌细胞上皮间质转化及抑制核因子NF-κB信号通路有关.