基于消化酶活力检测的鸡内金质量生物检定方法研究

鸡内金是消食化积类中药的代表,疗效确切,现代临床应用广泛.但目前鸡内金的药效物质研究基础较为薄弱,2020版《中国药典》收载的鸡内金质量控制方法比较简单,并不能够有效控制其质量.本研究提出基于胃蛋白酶活性的鸡内金生物效价测定方法,作为其质量控制新的技术方法.以胃蛋白酶活力为评价指标,优化鸡内金提取方法,采用"质反应平行线法"建立基于胃蛋白酶活性的鸡内金生物效价测定法,进行方法学考察,测定20个批次鸡内金的生物效价与可信限度;采用营养性半固体糊黏度测定方法验证不同效价鸡内金降低黏度的活性差异;对比研究小鼠胃残留率与胃蛋白酶活力、醇溶性浸出物含量的相关性差异,评价胃蛋白酶活力效价与体内活性的相关性.方法 学考察结果显示,鸡内金供试品的最优制备方法为:取鸡内金粗粉,加50倍量水,300 W、40 kHz超声提取0.5 h;其量效曲线形状与阳性对照药多酶片相似,精密度、中间精密度及重复性考察结果均符合要求;20批样品的效价范围为13.49～34.69 U·mg-1,平均值为22.21 U·mg-1,RSD为31.52％.验证实验结果显示,鸡内金样品效价越高,降低营养糊黏度效果越显著;小鼠胃残留率与胃蛋白酶活力效价、醇溶性浸出物含量的相关性系数r分别为0.867、0.518,表明胃蛋白酶活力效价与体内活性高度相关.研究结果表明,本文建立的基于胃蛋白酶活性的鸡内金生物效价测定法方法可靠,重复性良好,能够直接反映鸡内金的质量优劣,可为其他消食类中药的质量评控参考方法.