BALB/c小鼠单纯疱疹病毒性角膜炎复发感染模型的建立及鉴定

目的:探索单纯疱疹病毒性角膜炎(HSK)复发模型的建立及鉴定方法。方法:选取12只BALB/c健康小鼠，采用随机数字表法按照紫外灯照射时间不同分为紫外灯照射3 min组、2 min45 s组和2 min30 s组，每组4只，观察角膜损伤情况以确定最适紫外灯照射参数。另取72只BALB/c健康小鼠，采用随机数字表法将其分为空白对照组、模型组和复发组，每组24只。所有小鼠均用手术刀片在右眼角膜划开#字，空白对照组滴入5 μl生理盐水，模型组和复发组均滴入Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1)悬液，感染后不予腹腔内注射HSV-1异种血清抗体。初次感染病毒后5周，对复发组采取紫外灯照射法诱导小鼠模型眼疾病复发；评价眼表病变症状评分和角膜擦拭液相对应的非洲绿猴肾(Vero)细胞培养后细胞的形态学改变。结果:照射时长2 min45 s为紫外灯照射最适条件。模型组和复发组小鼠在初次感染后1周内出现HSK表现，1周后症状逐渐消失。诱导复发前裂隙灯显微镜检查模型组和复发组小鼠HSK均未自发性复发，经紫外灯照射后复发组小鼠1周内复发，出现HSK表现。诱导复发后1 d，空白对照组、模型组和复发组眼表病变症状评分分别为0.333±0.471、1.500±0.764和2.667±0.943；3 d时分别为0.000±0.000、0.833±0.373和5.167±2.267；7 d时分别为0.167±0.373、1.000±0.577和3.000±1.155；诱导复发后3 d，复发组眼表病变症状评分均高于空白对照组和模型组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。Vero细胞培养小鼠角膜擦拭液后发生漂浮、聚拢等形态学改变(CPE病变)，复发组小鼠角膜擦拭液细胞培养CPE病变阳性率为71%(17/24)，明显高于模型组的8%(2/24)，差异有统计学意义( P<0.01)。综合2个指标计算建模复发成功率可达71%。 结论:紫外灯照射可成功诱导未注射中和血清抗体的HSK小鼠复发。