家蝇抗真菌肽-1A对人肝癌细胞HepG2抑制作用的机制

目的 探究家蝇抗真菌肽-1A(MAF-1A)对人肝癌细胞HepG2抑制作用的机制.方法 采用原核串联表达及镍柱亲和层析法制备MAF-1A;取人肝癌细胞HepG2进行传代培养,采用透射电镜技术,观察不同浓度MAF-1A(0、50、100mg/L)作用细胞HepG2细胞24h后对细胞超微结构的影响;采用流式细胞术检测MAF-1A(0、100、200及400mg/L)作用HepG2细胞24h后的细胞周期、细胞内ROS水平及细胞凋亡率;以荧光探针法检测MAF-1A(0、100、200及400mg/L)作用HepG2细胞24h后的线粒体膜电位.结果 透射电镜结果显示,MAF-1A作用后HepG2细胞出现染色质边集,核固缩,胞膜出芽、空泡化、形成凋亡小体等形态学变化;流式细胞术检测结果显示,与0mg/L MAF-1A组比较,MAF-1A各浓度组均可使G0/G1期的细胞比例升高(P<0.01),细胞凋亡率明显增高(P<0.01),当MAF-1A浓度达400mg/L时、细胞内活性氧(ROS)含量明显增多(P<0.01);荧光探针检测发现,与0mg/L MAF-1A组比较,MAF-1A可使HepG2细胞的线粒体膜电位显著下降,并且随着MAF-1A浓度的升高,线粒体膜电位下降细胞数的占比增高.结论 MAF-1A可能通过促进线粒体膜电位下调、增加细胞内ROS含量所介导的细胞凋亡,以及阻滞细胞周期来发挥抑制HepG2细胞的作用.