乳腺癌4T1细胞中过表达鼠白介素-10对宿主抗肿瘤免疫应答的影响

目的 研究鼠白介素-10(mIL-10)对BALB/c小鼠三阴性乳腺癌4T1细胞生长以及荷瘤小鼠抗肿瘤免疫应答的影响.方法 将重组质粒pLenti-CMV-mIL-10-GFP-puro以及pLenti-CMV-GFP-puro分别与慢病毒包装质粒共转染293T细胞,收集病毒上清感染4T1细胞,从而获得过表达mIL-10的细胞株即4T1/mIL-10(实验组)以及4T1/GFP(对照组);酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)以及流式细胞术(flow cytometery,FCM)检测感染效率及细胞中mIL-10的表达水平;细胞计数检测细胞的增殖能力;应用FCM检测细胞表面CD86、主要组织相容性复合体Ⅱ类抗原(MHCⅡ)、程序性死亡配体1(programmed cell death ligand 1,PDL1)的表达.将4T1/GFP、4T1/mIL-10细胞分别皮下注射至BALB/c小鼠,建立小鼠乳腺癌皮下移植瘤模型即未治疗组和mIL-10治疗组,观察肿瘤生长情况,绘制生长曲线,并使用流式细胞仪检测肿瘤组织中T细胞的变化.结果 成功构建过表达mIL-10的4T1细胞,ELISA以及FCM检测结果表明,与对照组比较,实验组的mIL-10表达水平显著增加(P<0.05).与对照组比较,实验组细胞的增殖以及表面分子CD86、MHCⅡ分子、PDL1的表达无显著差异(P>0.05).动物实验模型表明,与未治疗组比较,mIL-10治疗组肿瘤组织中CD8+T/CD4+T的比例以及CD8+T细胞IFN-γ的表达水平明显增加,肿瘤生长受到抑制(P<0.05).结论 mIL-10能够促进宿主抗肿瘤免疫应答,从而抑制乳腺癌的生长.