大鼠Kruppel样因子14腺病毒载体的构建及其对心肌细胞肥大的影响

目的 检测生理状态和病理性肥大时大鼠乳鼠心肌细胞(NRVM)内Kruppel样因子14(KLF14)的表达水平.构建大鼠KLF14腺病毒载体,感染大鼠NRVM稳定高表达KLF14,探讨其对心肌细胞肥大的影响.方法 根据NCBI数据库KLF14的序列合成并构建pHBAd-MCMV-RFP-KLF14重组质粒,PCR和测序鉴定后通过大肠杆菌扩增,在HEK 293细胞中包装成KLF14腺病毒.用KLF14腺病毒或阴性对照红色荧光蛋白(RFP)腺病毒感染NRVM,使用异丙肾上腺素(ISO)刺激NRVM诱导心肌细胞肥大,RT-PCR检测BNP和KLF14的表达水平.结果 PCR和测序鉴定证实KLF14腺病毒质粒构建成功.RT-PCR检测感染KLF14腺病毒可以显著上调KLF14在NRVM中的表达,增加ISO上调的BNP的表达.结论 生理情况下,KLF14在心肌细胞中低丰度表达,病理性肥大时表达升高.KLF14过表达促进ISO诱导的心肌细胞肥大.