敲低PLK1对脉络膜黑色素瘤细胞增殖的抑制作用及其机制

目的 探究敲低PLK1对脉络膜黑色素瘤C918细胞增殖的影响及其可能的分子机制.方法 RT-qPCR和Western blot实验检测人脉络膜血管内皮细胞和脉络膜黑色素瘤细胞中PLK1表达.将C918细胞设置为阴性对照组(NC组)和两个PLK1敲低组(sh1组、sh2组).CCK-8和克隆形成实验检测敲低PLK1对C918细胞增殖的影响.流式细胞仪检测PLK1敲低对细胞周期的影响.Western blot检测PLK1敲低对组蛋白H3T3ph修饰的影响.ChIP实验检测组蛋白H3T3ph修饰在靶基因启动子上的富集情况.结果 与脉络膜内皮细胞相比,PLK1在脉络膜黑色素瘤C918细胞中显著高表达(P<0.05).与NC组细胞比较,敲低组PLK1的mRNA和蛋白水平均降低(P<0.05),PLK1敲低组细胞增殖显著被抑制(P<0.05),敲低PLK1组细胞周期阻滞于S期(P<0.05).相比于NC,敲低PLK1能抑制BUBR1基因的表达并降低组蛋白H3T3ph修饰水平.与IgG比较,H3T3ph修饰能够富集在BUBR1基因的启动子区域(P<0.05).结论 敲低PLK1能够抑制脉络膜黑色素瘤细胞增殖,其机制可能与PLK1通过介导H3T3ph修饰在BUBR1基因启动子上的富集进而促进BUBR1的基因转录有关.