干扰UCP2保护H9C2心肌细胞免受缺氧诱导的细胞凋亡并抑制细胞自噬

目的 研究干扰解偶联蛋白2(uncoupling protein 2,UCP2)表达对缺氧诱导的细胞凋亡及自噬的影响.方法 通过RT-qPCR检测缺氧后H9C2心肌细胞UCP2表达水平,活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)荧光实验检测干扰UCP2对细胞内ROS水平的影响,通过流式细胞实验检测细胞凋亡率,通过蛋白免疫印迹实验进一步检测干扰UCP2对cleaved-caspase 3的影响,并通过ELISA检测细胞损伤相关因子:乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、肌酸激酶(creatine kinase,CK)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α),最后检测细胞自噬相关因子:膜型LC3/胞浆型LC3(LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ)、自噬基因Beclin-1以及p62的表达水平.结果 缺氧环境下H9C2细胞中UCP2的表达量明显升高,干扰UCP2表达可以降低缺氧引起的细胞内ROS水平升高.干扰UCP2表达可以降低缺氧环境下H9C2细胞凋亡率,并且降低LDH、CK、IL-6和TNF-α的表达水平.在蛋白免疫印迹实验中,干扰UCP2表达可降低LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和Beclin-1表达,并增加p62的表达水平.结论 干扰UCP2可降低缺氧引起的细胞内ROS水平,并抑制缺氧引起的细胞凋亡及自噬.