免疫效应细胞增殖与细胞毒性功能检测3种方法的比较

目的:对比研究用于检测免疫效应细胞增殖与细胞毒功能的方法.方法:分别采用CCK-8法、EdU标记法、CFSE标记法检测不同培养条件下NK92细胞增殖[组1:100 U/mL白细胞介素(interleukin,IL)-2;组2:100 U/mL IL-2+10 U/mL IL-15].用乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放法、活细胞染料双标流式法、荧光素酶法检测两组NK92对K562细胞的杀伤.结果:CCK-8法检测结果提示组2增殖能力强于组1,但差异无统计学意义(P＞0.05),而EdU和CFSE标记法均提示两组间增殖能力有显著差异(P＜0.05).活细胞染料双标流式法与荧光素酶法均能够检测出不同效靶比下两组NK92细胞毒功能的差异(P＜0.05),LDH释放法在低效靶比下未检测出两组细胞毒性的差异(P＞0.05).以双标流式法的检测值为标准参照,荧光素酶法和LDH释放法的检测值与其呈显著相关性(rs=0.9794,P＜0.001;rs=0.973 2,P＜0.001).结论:CCK-8法更侧重于检测代谢活性,EdU和CFSE标记法更适用于悬浮类免疫细胞的增殖检测.3种细胞毒功能检测具有一致性,活细胞染料双标流式法适合检测对悬浮类靶细胞的杀伤,荧光素酶法比LDH释放法更适用于检测对贴壁细胞的杀伤作用.