GDF15激活ERK/Bcl-2通路增强BM-MSCs放射抗性

目的:探讨生长分化因子15(growth differentiation factor 15,GDF15)在调控人骨髓间充质干细胞(bone marrow mes-enchymal stem cells,BM-MSCs)放射抗性中的作用及机制.方法:利用Lipofectamine 3000转染siRNA,干扰BM-MSCs的GDF15表达.9 Gy Co-60 γ射线照射后,采用流式细胞术检测细胞周期及凋亡,CCK-8检测增殖,JC-1检测线粒体膜电位,免疫荧光、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白免疫印迹分析(Western blot)检测GDF15及ERK/Bcl-2信号通路关键分子的表达.结果:放射后GDF15的表达水平显著升高.未放射条件下,干扰GDF15对细胞周期、增殖和凋亡无显著影响(P＞0.05).放射后,干扰GDF15导致细胞G2期阻滞增加(P＜0.05),细胞增殖显著抑制(P＜0.01);同时线粒体膜电位降低,Caspase3活化及细胞凋亡增加(P＜0.05).干扰GDF15显著抑制ERK1/2的磷酸化和Bcl-2的蛋白水平,而增加Bax的表达.结论:放射诱导GDF15上调,可提高BM-MSCs的放射抗性,其机制与ERK/Bcl-2信号通路有关.