OPN通过p38MAPK信号通路调控肺动脉平滑肌细胞自噬
Chinese high altitude medicine and biology(2021)
摘要
目的 探讨骨桥蛋白(osteopontin,OPN)对肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs)增殖、自噬的影响及其机制.方法 采用免疫细胞化学法鉴定原代分离的PASMCs后,将PASMCs分为四组:空白对照组(OPN:Ong/mL)、OPN低剂量组(OPN:200ng/mL)、OPN 高剂量组(OPN:500ng/mL)、OPN与 p38MAPK 抑制剂共培养组[OPN:200ng/mL+SB203580:10μM].用Western blot法分别检测空白对照组、OPN低剂量组、OPN高剂量组中自噬因子Beclin1、LC3B和信号分子p38MAPK蛋白的表达水平及空白对照组、OPN低剂量组、共培养组中的p-p38MAPK、Beclin1、LC3B蛋白表达水平.用qPCR法检测空白对照组、OPN低剂量组、OPN高剂量组肺动脉平滑肌细胞中的Beclin1、LC3B mRNA表达水平.用MTT增值法检测不同浓度OPN(0、200、300、400、500ng/mL)对肺动脉平滑肌细胞增殖的影响.结果 与空白对照组相比,OPN低剂量组和OPN高剂量组中的自噬因子如Beclin1、LC3B蛋白和mRNA的表达量均降低(P<0.05),信号分子p38MAPK蛋白的表达量增高(P<0.05),肺动脉平滑肌细胞的增殖水平也增高(P<0.05).与OPN低剂量组比,共培养组的自噬因子Beclin1、LC3B蛋白的表达水平升高(P<0.05).结论OPN促进肺动脉平滑肌细胞增殖,且通过p38MAPK信号通路抑制肺动脉平滑肌细胞自噬.
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