多房棘球绦虫葡萄糖转运蛋白1重组抗原肽构建及原核表达方法建立
Chinese high altitude medicine and biology（2021）
摘要
目的 设计构建及表达纯化多房棘球绦虫葡萄糖转运蛋白1重组抗原肽(GLEP),为后续疫苗研究寻找有效工具.方法 用生物信息学软件预测EmGLUT1跨膜结构,将设计构建的表达载体pC zn1-GLEP转化入大肠杆菌真核表达系统,经IPTG诱导、Ni-NTA纯化获得目的 蛋白.结果 生物信息学软件分析结果表明EmGLUT1为12次跨膜蛋白,用柔性序列GS和KK将筛选后的肽段进行串联,构建重组表达载体pCzn1-GLEP,测序及酶切验证成功后,转化入Artic ex-press大肠杆菌表达系统(表达部位鉴定属于可溶性表达),经Ni-NTA亲和柱层析纯化后获得电泳纯级的GLEP蛋白.结论 成功构建GLEP的原核表达系统,并得到纯化重组蛋白,为后续疫苗研究提供有效工具.
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