PK-120表达异常在复发性流产妊娠免疫耐受机制中的作用

目的 探讨血浆激肽释放酶敏感性糖蛋白-120(PK-120)表达异常对复发性流产(RPL)妊娠免疫耐受与免疫细胞增殖的影响及其机制.方法 收集2018年1月～2020年1月华北理工大学附属医院妇产科住院的60例RPL患者临床资料,同期选择30例健康女性作为对照组.Western blot法与ELISA法测定RPL患者和对照组血清、外周单核细胞(PBMC)中PK-120蛋白表达及促炎性细胞因子(Th1)、抗炎性细胞因子(Th2)含量;人CD+14单核细胞和JEG-3人绒毛滋养细胞系分别分为空白组、siControl组、siPK-120组,转染48 h后检测各组细胞中Th1、Th2的表达;分别将MOCK、PK-120(F.L.)、PK-120(△BKD)、PK-120(T.R.)表达质粒转染入JEG-3细胞,比较Th1、Th2的分泌量;CCK-8实验检测干扰及过表达的PK-120基因对免疫细胞增殖的影响;采用共培养体系分析比较Th1、Th2、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、粘蛋白(MUC-1)、胎盘蛋白(PP-14)的表达量.结果 RPL患者血清中PK-120(T.R.)裂解片段表达显著增加,对照组PK-120(F.L.)表达增加;RPL患者PBMC中PK-120 mRNA表达水平低于对照组(P<0.05),但其PK-120(T.R.)裂解片段高于对照组(P<0.01);过表达和RNA干扰实验结果显示,PK-120(F.L.)组Th2表达上调,而PK-120(T.R.)组Th1表达上调(P<0.05);PK-120 siRNA、PK-120(T.R.)可有效促进免疫细胞增殖,而PK-120(F.L.)对免疫细胞增殖有明显抑制作用(P<0.05);RPL患者血清与JEG-3细胞共培养组Th1表达显著高于对照组,且共培养后RPL患者组MMP-2、MUC-1、PP-14明显低于对照组(P<0.05).结论 PK-120(T.R.)裂解片段在RPL患者血清与PBMC中呈现高表达,且PK-120(T.R.)可明显增强炎性反应及免疫细胞增殖.