脑膜瘤组织中脆性X相关基因1过表达促进脑膜瘤细胞生长与血管生成的研究
Hebei Medicine(2021)
Abstract
目的:探讨人脑膜瘤组织中RNA结合蛋白脆性X相关基因1(FXR1)表达情况及其对脑膜瘤细胞生长和血管生成的影响.方法:收集我院24例脑膜瘤患者的肿瘤组织及瘤旁组织标本,免疫组织化学染色检测FXR1表达.分离并培养人脑膜瘤细胞,将培养的细胞分为空白对照组、pcDNA3.1-NC组和pcDNA3.1-FXR1组,采用脂质体转染法将pcDNA3.1-FXR1质粒载体与pcDNA3.1空质粒载体转染至脑膜瘤细胞;实时荧光定量PCR和蛋白质印迹(Western blot)检测细胞中FXR1 mRNA和蛋白表达水平;CCK-8实验检测细胞增殖活性;细胞克隆形成实验检测细胞菌落形成能力;Western blot检测VEGF、EDN-1蛋白表达水平;流式细胞术检测血管内皮细胞的标记CD31与CD34的阳性细胞表达;体外小管生成试验检测HUVECs成管情况.结果:脑膜瘤组织中FXR1阳性表达较瘤旁组织显著增加(P<0.05).与空白对照组和pcDNA3.1-NC组比较,pcDNA3.1-FXR1组细胞中FXR1 mRNA和蛋白相对表达量均显著升高(P<0.05),转染48、72和96 h后细胞增殖活性显著升高(P<0.05),细胞克隆形成数目显著增加(P<0.05),VEGF、EDN-1蛋白表达水平显著增加(P<0.05),CD34和CD31标记的阳性细胞数显著增多(P<0.05)同时,管腔形成数目明显增多.结论:FXR1在人脑膜瘤组织中呈高表达,过表达FXR1可促进脑膜瘤细胞生长与血管生成.
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